分離純化的目的是去除粗提物中的其他雜質，獲得一定純度的目標產物。

小試純化工藝放大至生產規模時，耀海生物團隊會判斷工藝穩定性或設備差異對工藝過程及產物的影響。我們建議在小試與GMP生產的轉移過程中，增加中試放大的環節，以驗證純化工藝的穩定性和可行性，并對工藝參數加以調整使其高度契合生產規模。

層析是質粒DNA捕獲、中度純化和精度純化的重要工藝之一。耀海生物可提供中試規模的質粒DNA層析純化服務，滿足質粒經典三步法層析：凝膠過濾層析（分子篩, SEC）、嗜硫親和層析（AC）、陰離子交換層析（IEX），以及其他定制化層析工藝的中試放大需求，目的是高效捕獲超螺旋質粒，去除HCP、HCD與內毒素等殘留物質。

耀海生物具有十余年微生物體系質粒DNA和重組蛋白生產及服務經驗，我們能夠快速識別并控制關鍵參數，成功實現層析等純化工藝的放大。

服務詳情

純化工藝放大前后的差異

純化工藝放大經驗分享

純化放大生產時，第一步的過濾澄清必不可少。澄清的目的是進一步去除顆粒物質、避免對下游純化的不利影響，通常使用中空纖維或膜包完成，工藝轉移或放大過程中的關鍵參數包括處理批量、膜面積和流速。

層析純化，即采用不同的層析填料，將不同大小、電荷、極性和特異性的雜質去除，得到高純度目的產物的過程。

經典的質粒純化三步法層析為：

第一步通過分子篩/凝膠過濾層析（SEC）去除RNA；

第二步親和層析（AC）捕獲超螺旋質粒；

最后一步陰離子交換層析（ICX）去除內毒素。

層析工藝轉移中的關鍵參數包括：處理批量、柱體積、上樣體積和流速。

耀海生物生產團隊基于豐富的質粒生產服務經驗，總結了純化工藝轉移和放大過程中的常見問題和放大策略：